দুধের সংবেদনশীলতার জন্য নাইট্রোফুরান এএইচডি এলিসা ফুড র‍্যাপিড টেস্ট কিট অ্যান্টিবডি 0.04ppb 96Wells/Kit

দুধের সংবেদনশীলতার জন্য নাইট্রোফুরান AHD ELISA ফুড সেফটি টেস্ট কিট 0.04ppb 96Wells/Kit

 

1.নাইট্রোফুরান এএইচডি এলিসা ফুড সেফটি টেস্ট কিটনীতি

 

এই পরীক্ষার কিটটি নমুনায় অ্যামিনোহাইডানশন (AHD) সনাক্তকরণের জন্য প্রতিযোগিতামূলক এনজাইম ইমিউনোসায়ের উপর ভিত্তি করে।কাপলিং অ্যান্টিজেনগুলি মাইক্রো-ওয়েল স্ট্রাইপের উপর প্রাক-প্রলিপ্ত থাকে।নমুনায় অ্যামিনোহাইডানশন (এএইচডি) এবং মাইক্রো-ওয়েল স্ট্রাইপে প্রি-লেপযুক্ত কাপলিং অ্যান্টিজেনগুলি এএইচডি-বিরোধী অ্যান্টিবডিগুলির জন্য প্রতিযোগিতা করে।এনজাইম কনজুগেট যোগ করার পরে, রঙের জন্য TMB সাবস্ট্রেট যোগ করা হয়।নমুনার অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) মান এর মধ্যে AHD এর সাথে একটি নেতিবাচক সম্পর্ক রয়েছে।এই মানটিকে আদর্শ বক্ররেখার সাথে তুলনা করা হয় এবং পরবর্তীতে AHD ঘনত্ব পাওয়া যায়।

 

2.নাইট্রোফুরান এএইচডি এলিসা ফুড সেফটি টেস্ট কিটপ্রযুক্তিগত বিবরণ

 

সংবেদনশীলতা: 0.04 পিপিবি

ইনকিউবেশন তাপমাত্রা: 25 ℃

ইনকিউবেশন সময়: 30 মিনিট - 15 মিনিট

সনাক্তকরণ সীমা টিস্যু, ডিম, মধু: 0.1 পিপিবি

ক্রস প্রতিক্রিয়া হার

AHD 100%

AMOZ <0.1%

AOZ <0.1%

SEM < 0.1%

সুস্থতার হার

টিস্যু, ডিম 95±25%

মধু 75±25%

 

3. উপাদান

 

1	মাইক্রো-ওয়েল রেখাচিত্রমালা	8টি অপসারণযোগ্য সহ 12টি স্ট্রিপ কূপ প্রতিটি
2	6× স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ (প্রতিটি 1 মিলি)	0ppb	0.04ppb
		0.12 পিপিবি	0.36ppb
		1.08ppb	3.24ppb
3	এনজাইম কনজুগেট	7 মিলি	লাল টুপি
4	অ্যান্টিবডি কার্যকরী সমাধান	7 মিলি	নীল টুপি
5	সাবস্ট্রেট A	7 মিলি	সাদা টুপি
6	সাবস্ট্রেট বি	7 মিলি	কালো টুপি
7	সমাধান বন্ধ করুন	7 মিলি	হলুদ টুপি
8	20× ঘনীভূত ওয়াশিং বাফার	40 মিলি	সাদা টুপি
9	2× ঘনীভূত পুনরায় দ্রবীভূত সমাধান	50 মিলি	স্বচ্ছ টুপি
10	2-নাইট্রোবেনজালডিহাইড (C7H5NO3)	10 মিলি	কালো টুপি

 

4. উপকরণ প্রয়োজন কিন্তু প্রদান করা হয় না

 

1) সরঞ্জাম:মাইক্রোপ্লেট রিডার, প্রিন্টার, হোমোজেনাইজার, নাইট্রোজেন-শুকানোর যন্ত্র, ঘূর্ণি, সেন্ট্রিফিউজ, পরিমাপ পাইপেট, ভারসাম্য (0.01 গ্রাম একটি পারস্পরিক সংবেদনশীলতা), ইনকিউবেটর, জল স্নান;

2) মাইক্রোপিপেটর: একক-চ্যানেল 20-200µL, 100-1000µL, এবং মাল্টি-চ্যানেল 30～300µl;

3) রিএজেন্ট: NaOH, ইথাইল অ্যাসিটেট, এন-হেক্সেন, HCI (প্রায় 36.5%), K2HPO4·3H2O

 

5. নমুনা প্রাক চিকিত্সা

 

নির্দেশনা

যেকোনো ধরনের নমুনার প্রাক-চিকিত্সা করার আগে নিম্নলিখিত বিষয়গুলি অবশ্যই মোকাবেলা করা উচিত:

1) পরীক্ষার জন্য শুধুমাত্র নিষ্পত্তিযোগ্য টিপস ব্যবহার করা যেতে পারে এবং বিভিন্ন রিএজেন্ট শোষণের জন্য ব্যবহার করার সময় টিপস পরিবর্তন করতে হবে;

2) পরীক্ষার আগে, প্রতিটি পরীক্ষামূলক সরঞ্জাম অবশ্যই পরিষ্কার হতে হবে এবং পরীক্ষামূলক ফলাফলে হস্তক্ষেপকারী দূষণ এড়াতে প্রয়োজনে পুনরায় পরিষ্কার করা উচিত।

নমুনা প্রাক-চিকিত্সার আগে সমাধান প্রস্তুতি:

a)0.1 M K2HPO4: 11.4g K2HPO4·3H2O ডিওনাইজড পানিতে 500mL দ্রবীভূত করুন।

b)1 M HCl: 8.6mL HCI (প্রায় 36.5%) deionized জলে 100mL দ্রবীভূত করুন।

c)1 M NaOH: 4g NaOH ডিওনাইজড জলে 100mL দ্রবীভূত করুন।

d) 2×ঘনিষ্ঠ পুনঃদ্রবীকরণ দ্রবণটি 1:1 (1mL ঘনীভূত পুনরায় দ্রবীভূত দ্রবণ + 1 mL ডিওনাইজড জল), নমুনা পুনরায় দ্রবীভূত করার জন্য ব্যবহৃত ডিওনাইজড জলের সাথে মিশ্রিত করা হয়।

 

5.1 নমুনা প্রস্তুতি

ক) টিস্যু, ডিম

1) সমজাতীয় নমুনার ওজন 1± 0.05 গ্রাম, পাতিত জলের 4mL, 0.5mL 1 M HCI এবং 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) যোগ করুন, 2 মিনিটের জন্য সঠিকভাবে ঝাঁকান;

2) রাতে 37 ℃ এ ইনকিউবেট করুন (প্রায় 16 ঘন্টা) বা জল স্নানের মাধ্যমে 56 ℃ এ ইনকিউবেট করুন (2 ঘন্টা)।

3) প্রতিটি টিউবে 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH এবং 6mL ইথাইল অ্যাসিটেট যোগ করুন, 30 সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান।

4) 10 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় (20-25 ℃) 4000r/মিনিটের উপরে সেন্ট্রিফিউজ করুন (যদি ইমালসিফিকেশন বা ইথাইল অ্যাসিটেট স্তর 3ml এর জন্য যথেষ্ট না হয়, 80℃ জল স্নানের জন্য 10মিনিটের জন্য নমুনা ইনকিউবেট করুন এবং বারবার সেন্ট্রিফিউজ করুন; বা গতি বাড়ান এবং সেন্ট্রিফিউজের সময় প্রসারিত করুন)।

5) ইথাইল অ্যাসিটেট স্তরের 3mL একটি নতুন সেন্ট্রিফিউগাল টিউবে স্থানান্তর করুন এবং 50℃ এ নাইট্রোজেন বা বায়ু দ্বারা শুষ্কতায় বাষ্পীভূত করুন।

6) শুকনো অবশিষ্টাংশগুলিকে 2mL N-hexane-এ দ্রবীভূত করুন, 1mL মিশ্রিত পুনরায় দ্রবীভূত দ্রবণ যোগ করুন, 30 সেকেন্ডের জন্য সঠিকভাবে মেশান, 10 মিনিটের জন্য কক্ষ তাপমাত্রায় (20-25 ℃) 4000 r/min এর উপরে সেন্ট্রিফিউজ করুন;আপ-লেয়ার এন-হেক্সেন ফেজ সরান (যদি ইমালসিফিকেশন থাকে, আপ-লেয়ার এন-হেক্সেন ফেজ অপসারণের পরে, নমুনাটি 70℃ জলের স্নানে 10-20 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন, বারবার সেন্ট্রিফিউজ করুন)।

7) বিশ্লেষণের জন্য নিম্নের 50 μL নিন।

নমুনার পাতলা ভাঁজ: 2

খ) মধু

1) সমজাতীয় নমুনার (মধু) ওজন 2± 0.05 গ্রাম, প্রতিটি টিউবে 4mL পাতিত জল, 0.5mL 1 M HCI এবং 100 μL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) যোগ করুন, 2 মিনিটের জন্য সঠিকভাবে ঝাঁকান;

2) রাতে 37 ℃ এ ইনকিউবেট করুন (প্রায় 16 ঘন্টা) বা জল স্নানের মাধ্যমে 56 ℃ এ ইনকিউবেট করুন (2 ঘন্টা)।

3) প্রতিটি টিউবে 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH এবং 6mL ইথাইল অ্যাসিটেট যোগ করুন, 30 সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান।

4) ঘরের তাপমাত্রায় (20-25℃) 4000r/মিনিটের উপরে সেন্ট্রিফিউজ 10 মিনিটের জন্য (যদি ইমালসিফিকেশন থাকে বা ইথাইল অ্যাসিটেট স্তর 3ml এর জন্য যথেষ্ট না হয়, 80℃ ওয়াটার বাথ এ 10 মিনিটের জন্য নমুনা ইনকিউবেট করুন এবং বারবার সেন্ট্রিফিউজ করুন; বা গতি বাড়ান এবং সেন্ট্রিফিউজের সময় প্রসারিত করুন)।

5) ইথাইল অ্যাসিটেট স্তরের 3mL একটি নতুন সেন্ট্রিফিউগাল টিউবে স্থানান্তর করুন এবং 50 ℃ এ নাইট্রোজেন বা বায়ু দ্বারা শুষ্কতায় বাষ্পীভূত করুন।

6) শুকনো অবশিষ্টাংশগুলিকে 2mL N-hexane-এ দ্রবীভূত করুন, 1mL মিশ্রিত পুনরায় দ্রবীভূত দ্রবণ যোগ করুন, 30 সেকেন্ডের জন্য সঠিকভাবে মেশান, 10 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় (20-25 ℃) 4000r/মিনিটের উপরে সেন্ট্রিফিউজ করুন;আপ-লেয়ার এন-হেক্সেন ফেজ সরান (যদি ইমালসিফিকেশন থাকে, আপ-লেয়ার এন-হেক্সেন ফেজ অপসারণের পরে, নমুনাটি 70℃ জলের স্নানে 10-20 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন, বারবার সেন্ট্রিফিউজ করুন)।

7) বিশ্লেষণের জন্য নিম্নের 50 μL নিন।

নমুনার পাতলা ভাঁজ: 1

 

6. ELISA পদ্ধতি

 

6.1 নির্দেশাবলী

1) ব্যবহারের আগে ঘরের তাপমাত্রায় (20-25 ℃) সমস্ত রিএজেন্ট এবং মাইক্রো-ওয়েল স্ট্রিপগুলি আনুন;

2) ব্যবহারের পর অবিলম্বে 2-8 ℃ সব রিএজেন্ট ফেরত দিন;

3) ELISA বিশ্লেষণের পুনরুত্পাদনযোগ্যতা, অনেকাংশে, প্লেট ধোয়ার সামঞ্জস্যের উপর নির্ভর করে।প্লেট ধোয়ার সঠিক অপারেশন হল ELISA পদ্ধতির মূল বিষয়;

4) ধ্রুবক তাপমাত্রায় ইনকিউবেশনের জন্য, সমস্ত নমুনা এবং বিকারকগুলিকে আলোর এক্সপোজার এড়াতে হবে এবং প্রতিটি মাইক্রোপ্লেট কভার মেমব্রেন দ্বারা সিল করা উচিত।

 

6.2 অপারেশন পদ্ধতি

1) পরীক্ষার কিটটি কমপক্ষে 30 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় (20-25 ℃) আনুন, মনে রাখবেন যে প্রতিটি রিএজেন্ট ব্যবহার করার আগে সমানভাবে মিশ্রিত করার জন্য অবশ্যই ঝাঁকাতে হবে, প্রয়োজনীয় মাইক্রো-ওয়েল স্ট্রিপগুলি প্লেট ফ্রেমে রাখুন।অব্যবহৃত মাইক্রোপ্লেট পুনরায় সিল করুন, 2-8 ℃ এ সংরক্ষণ করুন, হিমায়িত নয়।

2) সমাধান প্রস্তুতি: 1:19 এ ডিওনাইজড জল দিয়ে 20 × ঘনীভূত ওয়াশিং বাফারের 40mL পাতলা করুন (1 অংশ 20 × ঘনীভূত ওয়াশিং বাফার + 19 অংশ ডিওনাইজড জল)।অথবা প্রয়োজন অনুযায়ী প্রস্তুত করুন।

3) সংখ্যায়ন: নমুনা এবং মান সমাধান অনুযায়ী মাইক্রো-কূপ সংখ্যা;প্রতিটি নমুনা এবং মানক সমাধান ডুপ্লিকেট সঞ্চালিত করা উচিত, তাদের অবস্থান রেকর্ড.

4) পৃথক ডুপ্লিকেট কূপের মধ্যে 50µL নমুনা বা স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ যোগ করুন;প্রতিটি কূপে 50ul এনজাইম কনজুগেট তারপর 50µL অ্যান্টিবডি কার্যকরী দ্রবণ যোগ করুন, প্লেটটি ম্যানুয়ালি ঝাঁকিয়ে আলতোভাবে মেশান।কভার মেমব্রেন দিয়ে মাইক্রোপ্লেটটি সিল করুন, এবং 25 ℃ তাপমাত্রায় 30 মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।

5) মাইক্রোওয়েল থেকে তরল ঢালুন, শোষক কাগজে শুকানোর জন্য ফ্ল্যাপ করুন, 15-30 সেকেন্ডের জন্য মাইক্রোপ্লেট ধোয়ার জন্য 250µL/ওয়েল ওয়াশিং বাফার যোগ করুন, তারপর বের করুন এবং শোষক কাগজ দিয়ে শুকানোর জন্য ফ্ল্যাপ করুন, 4-5 বার পুনরাবৃত্তি করুন।(যদি ফ্ল্যাপ করার পরে বুদবুদ থাকে তবে পরিষ্কার টিপস দিয়ে কেটে ফেলুন)।

6) রঙ: প্রতিটি কূপে সাবস্ট্রেট A এর 50µL এবং তারপর B সাবস্ট্রেটের 50µL যোগ করুন।প্লেটটি ম্যানুয়ালি ঝাঁকিয়ে আলতোভাবে মিশ্রিত করুন, তারপর রঙ করার জন্য অন্ধকারে 15 মিনিটের জন্য 25 ℃ তাপমাত্রায় ইনকিউবেট করুন।

7) নির্ধারণ: প্রতিটি কূপে 50µL স্টপ দ্রবণ যোগ করুন।প্লেটটি ম্যানুয়ালি ঝাঁকিয়ে আলতোভাবে মেশান।প্রতিটি কূপের OD মান নির্ধারণ করতে মাইক্রোপ্লেট রিডারের তরঙ্গদৈর্ঘ্য 450nm এ সেট করুন।(5 মিনিটের মধ্যে ডুয়াল-ওয়েভলেংথ 450/630nm-এ OD মান পড়ার পরামর্শ দিন)।

 

7. ফলাফল রায়

 

ফলাফল বিচার করার দুটি পদ্ধতি আছে: প্রথমটি হল রুক্ষ বিচার, দ্বিতীয়টি হল পরিমাণগত নির্ণয়।নোট করুন যে নমুনার OD মান AHD এর বিষয়বস্তুর সাথে একটি নেতিবাচক সম্পর্ক রয়েছে।

7.1 গুণগত সংকল্প

ঘনত্বের পরিসর (ng/mL) স্ট্যান্ডার্ড সমাধানের সাথে নমুনার গড় OD মান তুলনা করে পাওয়া যেতে পারে।নমুনাⅠ-এর OD মান 0.3, এবং নমুনাⅡ-এর OD মান হল 1.0ppb, মানক সমাধানগুলির OD মান হল: 0ppb-এর জন্য 2.243, 0.04ppb-এর জন্য 1.816, 0.12ppb-এর জন্য 1.415, 0.310-310-এর জন্য 0.74। ppb, 3.24ppb-এর জন্য 0.155, সেই অনুযায়ী নমুনাⅠ-এর ঘনত্বের পরিসর হল 1.08 থেকে 3.24ppb, এবং নমুনার 0.12 থেকে 0.36ppb৷

7.2 পরিমাণগত সংকল্প

শোষণের মানগুলির গড় মানগুলি নমুনার গড় OD মান (B) এবং প্রথম স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ (0 মান) এর OD মান (B0) দ্বারা বিভক্ত এবং পরবর্তীতে 100% দ্বারা গুণিত মান সমাধানের জন্য প্রাপ্ত হয়, যা ,

শোষণ মানের শতাংশ =	খ	×100%
	B0

B—নমুনার গড় (ডবল কূপ) OD মান বা আদর্শ সমাধান

B0—0ng/mL স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণের গড় OD মান

যথাক্রমে Y- এবং X-অক্ষ হিসাবে স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণের শোষণ শতাংশ এবং AHD স্ট্যান্ডার্ড দ্রবণ (ng/mL) এর সেমিলোগারিদম মানগুলির সাথে আদর্শ বক্ররেখা আঁকুন।আদর্শ বক্ররেখা থেকে নমুনার অনুরূপ ঘনত্ব পড়ুন এর শোষণ শতাংশ মান বক্ররেখায় অন্তর্ভুক্ত করে।ফলস্বরূপ মান পরবর্তীতে সংশ্লিষ্ট পাতলা ভাঁজ দ্বারা গুণিত হয়, অবশেষে নমুনায় AHD ঘনত্ব প্রাপ্ত হয়।

 

8. সতর্কতা

 

1) ঘরের তাপমাত্রা 25℃ থেকে কম বা বিকারক তাপমাত্রা এবং নমুনা ঘরের তাপমাত্রায় (20-25℃) ফেরত দেওয়া হয় না, যা স্ট্যান্ডার্ড OD মান হ্রাস করতে পারে।

2) ওয়াশিং প্রক্রিয়া চলাকালীন, মাইক্রোপ্লেটের শুকানোর সাথে স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার অ-রৈখিকতা এবং অসন্তোষজনক প্রজননযোগ্যতা থাকবে;অতএব, ধোয়ার পর অবিলম্বে পরবর্তী ধাপে এগিয়ে যান।

3) ভালভাবে মিশ্রিত করুন, অন্যথায় দুর্বল প্রজননযোগ্যতা থাকবে।

4) স্টপ দ্রবণ হল 2 এম সালফিউরিক অ্যাসিড দ্রবণ, ত্বকের সাথে যোগাযোগ এড়িয়ে চলুন।

5) মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখের পরে কিট ব্যবহার করবেন না।কিট থেকে পাতলা বা ভেজাল রিএজেন্ট ব্যবহারের ফলে সংবেদনশীলতা এবং সনাক্তকরণ OD মান পরিবর্তন হতে পারে।কিটের বিভিন্ন ব্যাচে রিএজেন্ট প্রতিস্থাপন করবেন না।

6) স্ব-সিলিং ব্যাগগুলিতে অব্যবহৃত মাইক্রোপ্লেটগুলি পুনরায় সিল করুন।স্ট্যান্ডার্ড সলিউশন এবং বর্ণহীন কাপলারগুলি হালকা-সংবেদনশীল এবং সরাসরি আলোর সংস্পর্শে আসতে পারে না।

7) যেকোন টিন্টিং দ্রবণ বর্জন করুন যার রঙ নির্দেশ করে যে দ্রবণটি হ্রাস পেয়েছে।স্ট্যান্ডার্ড সলিউশন 1 (0 ppb) এর জন্য 0.5 এর কম একটি সনাক্তকরণ মান অবনতি নির্দেশ করে।

8) সর্বোত্তম প্রতিক্রিয়া তাপমাত্রা 25℃, এবং সনাক্তকরণ সংবেদনশীলতা এবং OD মান পরিবর্তন হবে যদি তাপমাত্রা খুব বেশি বা খুব কম হয়।

 

9. স্টোরেজ এবং মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ

 

সঞ্চয়স্থান: 2 থেকে 8 ℃ এ সঞ্চয় করুন, হিমায়িত নয়।

মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ: 12 মাস;উত্পাদনের তারিখ বাক্সে রয়েছে।

দ্রষ্টব্য: যদি মাইক্রোপ্লেটের ভ্যাকুয়াম প্যাকেজ ফুটো থাকে, তবে এটি এখনও ব্যবহার করা বৈধ, পরীক্ষার ফলাফলকে প্রভাবিত করবে না, ব্যবহারে শিথিল হোন।

 

 

প্রশ্ন 1: কখন এটি পাঠানো হবে?
A1: আমরা পেমেন্ট পাওয়ার পরে 7 কার্যদিবসের মধ্যে যত তাড়াতাড়ি সম্ভব আপনার জন্য পণ্যগুলি প্রেরণ করব।(মহামারী এবং অন্যান্য বাহ্যিক কারণের ক্ষেত্রে, শিপিংয়ে বিলম্ব হতে পারে)

 

প্রশ্ন 2: এটি কি OEM/ODM সমর্থন করে?
A2: এটি সমর্থিত হতে পারে, তবে কাস্টমাইজড পণ্যগুলির সুবিধার জন্য নির্দিষ্ট পরিমাণ 100,000 টুকরার বেশি হওয়া দরকার।

 

প্রশ্ন 3: মান নিয়ন্ত্রণের ক্ষেত্রে আপনার কারখানা কেমন করছে?
A3: আমাদের কাছে ISO9001 এবং ISO13485 রাষ্ট্র দ্বারা প্রত্যয়িত রয়েছে।আমাদের উত্পাদন প্রক্রিয়া মান প্রক্রিয়া অনুযায়ী, যা নিশ্চিত করতে পারে যে পণ্যের গুণমান সর্বোত্তম।

 

প্রশ্ন 4: বিক্রয়োত্তর পরিষেবা কীভাবে সরবরাহ করা হয়?
A4: আমরা পেশাদার অনলাইন প্রযুক্তিগত বিক্রয়োত্তর সেবা প্রদান করি।আমরা আপনাকে ভিডিও, ফোন কল ইত্যাদি আকারে একের পর এক নির্দেশিকা প্রদান করতে পারি।

 

প্রশ্ন 5: পেমেন্ট পদ্ধতি কি?
A5: আমরা T/T দ্বারা অর্থপ্রদান পাই।

 

প্রশ্ন 6: কিভাবে শিপিং?
A6: আমাদের অনেক সমবায় বাহক থেকে উদ্ধৃতি প্রাপ্ত করে, আপনার জন্য শিপ করার সর্বোত্তম উপায় চয়ন করুন, অথবা আপনি আপনার প্রয়োজনীয়তা অনুযায়ী শিপ করতে পারেন।